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柱色譜分離提純是根據(jù)二茂鐵和乙酰二茂鐵對硅膠吸附能力的差異而進行分離提純。柱層析是在層析柱中裝入作為固定相的吸附劑，把試樣流經(jīng)固定相而被吸附，然后利用薄層層析中探索到的能分離組分的溶劑流經(jīng)層析柱，試樣中的各組在固定相和溶劑間重新分配，分配比大的組分先流出，分配比小的組分后流出，對于不易流出的組分可另選擇合適的溶劑再進行洗脫，這樣就可以達到各組分的分離提純。 柱色譜（柱上層析）常用的有吸附色譜和分配色譜兩類。吸附色譜常用氧化鋁和硅膠作固定相；而分配色譜中以硅膠、硅藻土和纖維素作為支持劑，以吸收較大量的液體作固定相，而支持劑本身不起分離作用。 吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經(jīng)過活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當(dāng)待分離的混合物溶液流過吸附柱時，各種成分同時被吸附在柱的上端。當(dāng)洗脫劑流下時，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脫的速度也不同，于是形成了不同層次，即溶質(zhì)在柱中自上而下按對吸附劑的親和力大小分別形成若干色帶，再用溶劑洗脫時，已經(jīng)分開的溶質(zhì)可以從柱上分別洗出收集；或?qū)⒅桑瑪D出后按色帶分割開，再用溶劑將各色帶中的溶質(zhì)萃取出來。
柱色譜分離提純是根據(jù)二茂鐵和乙酰二茂鐵對硅膠吸附能力的差異而進行分離提純。化合物的吸附性與它們的極性成正比，化合物極性越強，其吸附性越強。由于二茂鐵的極性弱于乙酰二茂鐵，二茂鐵首先向下移動，被洗脫下來。加強洗脫劑的極性，乙酰二茂鐵也被洗脫下來，從而將乙酰二茂鐵和二茂鐵分離開。
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